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PCR實操避坑分享發(fā)布時間：2025-09-28

前段時間和大家分享了PCR反應(yīng)的過程控制，今天來聊聊PCR的操作手法。實操可以說是整個PCR實驗流程中最容易被忽略卻又至關(guān)重要的一環(huán)。下面小編就來分享一下自己當(dāng)初的一些經(jīng)驗心得，僅代表個人看法。先說體系配置（各組分分開，非預(yù)混液）。配置前先計算好所需要的各組分體積，統(tǒng)一配置好后再...

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2022
3-16

程序降溫盒使用小技巧
程序降溫盒在沒有酒精或任何液體的情況下,能確保在低溫冰箱中樣品的降溫速率為-1℃/分鐘。它們可以運用于各種細胞類型，包括干細胞，原代細胞和細胞系。這對于大多數(shù)需要培養(yǎng)的細胞系來說是非常理想的。已經(jīng)通過干細胞，原代細胞和細胞系的使用，證明了提...
2022
3-10

迷你梯度PCR儀常用的五種分析方法
迷你梯度PCR儀的梯度溫度控制是一項可有助于PCR中引物退火優(yōu)化的功能。梯度設(shè)定的目的是在模塊之間實現(xiàn)變化的溫度，通過每列之間≥2°C的間隔溫度升降，使得可同時對于一系列的溫度進行測試以獲取引物退火溫度。該技術(shù)的一種形式便是設(shè)計帶有三個或更...
2022
3-1

三槽梯度PCR儀科普知識大全，你真不一定都懂
三槽梯度PCR儀溫度的準(zhǔn)確性可能會對PCR的成敗與否起決定性作用，因為PCR的三個主要步驟都依賴于溫度。類似地，加熱模塊上孔與孔之間的溫度一致性對于獲取可靠而可重復(fù)的PCR結(jié)果也是至關(guān)重要的。因此，所使用的PCR儀能在模塊之間準(zhǔn)確到達設(shè)定的...
2022
1-21

雙槽梯度PCR儀應(yīng)該這樣使用
雙槽梯度PCR儀的反應(yīng)原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性一退火（復(fù)性）--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)間后，使模板DN...
2022
1-17

熒光定量基因擴增儀使用必須遵守下面的基本安全措施
熒光定量基因擴增儀在操作、維護和修理本儀器的所有階段，都必須遵守下面的基本安全措施。如果不遵守這些措施或本說明書其它地方指出的警告，便可能影響到儀器提供的保護。同時，這也會破壞設(shè)計和制造的安全標(biāo)準(zhǔn)以及儀器的預(yù)期使用范圍。a）儀器接地為了避免...
2022
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熒光定量PCR的理論依據(jù)是什么？
熒光定量PCR在反應(yīng)中，引入了一種熒光化學(xué)物質(zhì)，隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化。從而得到一條熒光擴增曲線。熒光擴增曲線...

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